国产人与zoxxxx另类_亚洲精品99久久久久中文字幕_国产成人麻豆精品午夜福利在线_国产精品一区二区久久精品_无码少妇精品一区二区免费动态

購物車(
清空購物車
2022-11-303639 次瀏覽
核酸檢測

一、實驗室常用核酸的濃度與純度檢測

核酸濃度與純度檢測最簡單常用的儀器是微量紫外分光光度計,代表為NanoDrop。NanoDrop分光光度計利用分子的紫外吸收特性來測定樣品濃度。核酸吸收峰為260nm,蛋白樣品吸收峰為280nm。此外,很多提取過程中殘留的污染物通常在280nm和230nm處有吸收峰。[ NanoDrop Spectrophotometer Resources | Thermo Fisher Scientific - CN]樣品濃度與吸光度成正比關系(Beer-Lambert Law),因此通過測定吸收峰就可以得出核酸樣品的濃度。

核酸樣品的純度可以由A260/A280、A260/A230兩個比值來反應。純度較高DNA的A260/A280應在1.8左右,RNA在2.0左右。若DNA樣品的A260/A280數(shù)值偏向2.0,則表明存在RNA污染,如有需要應使用RNA酶處理樣品并純化,反之亦然。A260/A230數(shù)值可以反應樣品中有機物污染水平,一般大于2.0則較好,若偏低則表示產(chǎn)物中含胍或乙醇等有機物的污染(如表1所示)。


比值 測定樣品 “純”樣品的比值范圍 比值異常的原因
A260/A280 核酸 DNA: ~1.8 RNA: ~2.0 造成低比值的污染物: -蛋白質(zhì) -核酸提取步驟中的殘余苯酚和其他試劑
A260/A230 核酸 DNA/RNA: ~2.0-2.2  

造成低比值的污染物: -蛋白質(zhì) -碳水化合物 -提取中的殘余苯酚 -殘余胍(常見于提取柱類方法) -用作輔助沉淀劑的糖原 造成高比值的原因: -空白對照有誤
A260/A280 蛋白 ~0.6 造成高比值的污染物: -核酸

表一 紫外吸收法反應純度的關鍵比值2

DNA的濃度檢測經(jīng)常會影響后續(xù)實驗的操作,濃度過高和過低都會影響PCR、酶切酶連等反應的進行。因此要進行適當稀釋,保證反應體系中DNA終濃度在合適的范圍內(nèi)。
另外一種常用的核酸檢測方法為熒光光度法(代表常用儀器為Qubit),利用核酸與靶標選擇性染料結(jié)合后發(fā)光的原理來檢測濃度,可以檢測濃度非常低的樣品,靈敏度比紫外分光光計高。該方法檢測不同性質(zhì)和結(jié)構(gòu)的核酸時需要特定的試劑盒,因此成本較高。

二、實驗室核酸樣品質(zhì)量檢測
核酸電泳是常用于檢測DNA與RNA完整性的方法。將核酸樣品加入瓊脂糖凝膠上的加樣槽后,通過電泳作用,不同大小的核酸分子會以不同速率向正極遷移。長鏈、環(huán)形的核酸遷移速度比短鏈、線型的核酸分子慢。通過熒光染料溴乙錠或商品化染料SybrGreen、GelRed等染料染色,電泳結(jié)束后即可在紫外下觀察核酸分子的遷移情況。與核酸大小標準物對比即可判斷核酸樣品是否存在斷裂或污染的情況。

NanoDrop Spectrophotometer Resources | Thermo Fisher Scientific - CN
NanoDrop Spectrophotometer Resources | Thermo Fisher Scientific - CN

核酸檢測過程中可以用到的耐思耗材:
槍頭(100μL、200μL、1000μL等);微量離心管(1.5mL、2mL);PCR管類。
无码人妻精品一区二区三区99不卡 | 国内精品视频一区二区三区八戒| 国产新婚夫妇叫床声不断| 手机在线观看h中文字幕| 欧美18精品久久久无码午夜福利| 欧美牲交a欧美在线| 国产精品无码一区二区在线观一 | 男女啪啪免费观看无遮挡| 性一交一乱一伦| 色婷婷综合中文久久一本| 久久久久亚洲av无码专区首jn| 岛国av三级在线播放| 亚洲小说乱欧美另类| 国产成人精品2021| 久久久久欧美精品| 天天躁日日躁狠狠躁人妻| 夜夜夜高潮夜夜爽夜夜爰爰| 亚洲精品色情app在线下载观看| 久久人人妻人人做人人爽| 亚洲精品久久久久中文第一幕| 欧洲多毛裸体xxxxx| 乱中年女人伦av一区二区| 国产成人精品一区二三区在线观看 | 激情内射亚州一区二区三区爱妻| 女邻居丰满的奶水| 欧美刺激性大交| 一区二区三区视频| 国产精品夜夜春夜夜爽久久| 国产又色又爽又高潮免费视频麻豆| 一本一道波多野结衣av中文| 特级a欧美做爰片第一次| 免费观看激色视频网站| 国产大片内射1区2区| 99久久国产露脸国语对白| 久久久亚洲精品成人| 国产黄a三级三级三级| 午夜福利十八周岁成人| 亚洲精品欧美二区三区中文字幕| 99久久国产综合精品女图图等你| 亚洲综合国产成人丁香五月激情| 好爽毛片一区二区三区四|